瞬時轉染與穩(wěn)定轉染，這兩者都是將目的基因轉染至特定哺乳動物細胞內，進而表達得到目的蛋白。但兩種方式在原理，操作流程等方面均有所區(qū)別。
一、實驗原理：
瞬時轉染原理：外源基因并沒有轉染到細胞的染色體上而是存在于游離的載體上,這樣可以在短時間內獲得基因的表達產物，但是隨著細胞的不斷分裂增殖外源基因最終會丟失，無法繼續(xù)進行重組蛋白的生產。
穩(wěn)定轉染原理：外源基因轉染至細胞染色體上，目的基因不會隨著細胞傳代而消失，能夠長期穩(wěn)定的生產目的蛋白。通過穩(wěn)定轉染(穩(wěn)定細胞系構建)能夠實現(xiàn)長期、穩(wěn)定的生產重組蛋白。
二、操作步驟
1、瞬時轉染與穩(wěn)定轉染所用的質粒是不同的，瞬轉的質粒不需要帶有抗性，而用于穩(wěn)定轉染的質粒一定要帶有特定的抗性以便于后續(xù)的克隆株篩選。另外，兩者所用的培養(yǎng)基及實驗試劑也有所區(qū)別。
2、瞬時轉染的操作比構建穩(wěn)定細胞系的操作簡單，構建好質粒后,經過細胞復蘇、轉染、細胞培養(yǎng)、蛋白純化等步驟即可得到目的蛋白;而構建穩(wěn)定細胞系需要先將構建好的質粒線性化，再得入培養(yǎng)好的哺乳動物細胞內，通過一定的轉染方式實現(xiàn)質粒與細胞的融合，接著經過細胞池篩選、單克隆篩選、細胞傳代培養(yǎng)等步驟才能得到穩(wěn)定轉染的細胞系。對穩(wěn)定細胞系進行培養(yǎng)能夠長期穩(wěn)定的生產目的蛋白。
三、特點：
瞬時轉染：能夠快速生產得到微量至中量的重組蛋白；實驗成本低；一個宿主可以帶有多個拷貝，表達效率高。
穩(wěn)定細胞系構建：能夠長期穩(wěn)定生產目的蛋白；得到穩(wěn)轉株之后后續(xù)生產蛋白的成本降低；
能夠對基因進行基因插入、基因敲除等編輯操作。
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