公司產(chǎn)品僅供科研研究使用、不得用于臨床診斷！

1、細(xì)胞傳代：

1）細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)瓶的 80%面積時(shí)，棄 25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液，用 PBS 清洗細(xì)胞一次；

2）添加 0.25%消化液約 1ml 至培養(yǎng)瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后加入 5ml 培養(yǎng)

液終止消化，再輕輕吹打細(xì)胞使之脫落，然后將懸液轉(zhuǎn)移至 15ml 離心管中，1000rpm 離心 5min；

3）棄上清，沉淀細(xì)胞用 1-2ml 培養(yǎng)基重懸，然后按 1:2 比例進(jìn)行分瓶傳代，最后放入 37℃，5%CO2細(xì)胞

培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

一、商品介紹：

2、細(xì)胞凍存：

1）細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)瓶的 80%面積時(shí)，棄 25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液，用 PBS 清洗細(xì)胞一次；

2）添加 0.25%消化液約 1ml 至培養(yǎng)瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后加入培養(yǎng)液終

止消化，輕輕吹打細(xì)胞使之脫落，然后將懸液轉(zhuǎn)移至 15ml 離心管中，1000rpm 離心 5min；

3）用適量的凍存液（FBS：DMSO=9 ：1）重懸細(xì)胞，并放置于凍存管中；

4）先將細(xì)胞凍存管放置于-20℃ 1.5h，然后將其移入-80℃過(guò)夜，24h 后轉(zhuǎn)入液氮中進(jìn)行長(zhǎng)期保存。使用程序

降溫盒可直接放入-80℃。

二、細(xì)胞培養(yǎng)操作

1) 復(fù)蘇細(xì)胞：以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說(shuō)明書為主。將含有1 mL細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加4 mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min，棄去上清液，加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10 cm皿中，加入約8 mL培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2) 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。

b、加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，使消化液浸潤(rùn)所有細(xì)胞，將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2 min（視細(xì)胞情況而定），然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加2-3ml培養(yǎng)基終止消化。輕輕打勻后裝入無(wú)菌離心管中，1000 rpm離心5 min，棄去上清液，補(bǔ)加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻。

c、將細(xì)胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中，置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。 3) 細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例；a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液，裝入無(wú)菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。

b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無(wú)血清細(xì)胞凍存液，使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

公司正在出售的產(chǎn)品：

IL17A Protein Human 重組人 IL17 / IL17A 蛋白 大鼠前列腺酸性0酸酶(ACP3)ELISA試劑盒 OPN(Mouse Osteopontin)  小鼠骨橋素 96T

NIR1： 膜相關(guān)0脂轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白抗體 IL3 Others Human 人 IL-3 / Ierleukin-3 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

小鼠視網(wǎng)膜muller細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL 大鼠前列腺素H2(PGH2)ELISA試劑盒 TALLA-1/CD231(Human T-cell acute lymphoblastic leukemia antigen)  人T細(xì)胞急性淋巴母細(xì)胞白血病相關(guān)抗原 96T

Natrexone： 納曲酮抗體 3T3-Swiss albino細(xì)胞，胚胎成纖維細(xì)胞 人胰腺癌細(xì)胞,CRL細(xì)胞 CM-M048小鼠腸巨噬細(xì)胞培養(yǎng)基100mL

ROBO4 Others Mouse 小鼠 ROBO4 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 大鼠前列腺素F受體(FP)ELISA試劑盒 MPO-ANCA IgG  大鼠髓過(guò)氧化物酶特異性抗中性粒細(xì)胞胞質(zhì)抗體 子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)

IL-1R1： 白介素1受體1抗體 人海馬神經(jīng)元 人肺癌細(xì)胞，NCI-H226[H226]細(xì)胞 P388D1(淋巴瘤細(xì)胞)

PVRL2 Others Rat 大鼠 CD112 / Nectin-2 / PVRL2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 人(EPI)ELISA 試劑盒 Measles virus protein(Plant2 derived measles virus hemagglutinin protein) 麻疹病毒紅血球凝集素蛋白多肽 0.5mg

IL-1R2： 白介素1受體2抗體 大鼠腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞;C6

Vero細(xì)胞，綠猴腎細(xì)胞 RSC96(大鼠雪旺細(xì)胞) 小鼠肉瘤瘤株;S180 犬組胺(HIS)ELISA 試劑盒 HSL(hormone-sensitive lipase) 荷爾蒙敏感脂肪酸(抗原) 0.5mg

IL-20R alpha： 白介素20受體α鏈抗體 AXL Others Mouse 小鼠 Axl Kinase 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

QSG-7701人正常肝細(xì)胞DCE 雞胚成纖維細(xì)胞 大鼠β羥(βOHB)ELISA 試劑盒 ANGPTL3(Human angiopoietin-like protein 3)  人血管生成素樣蛋白3 96T

RCAN2： 鈣調(diào)神經(jīng)0酸酶調(diào)節(jié)蛋白2抗體 RAW264.7細(xì)胞，單核細(xì)胞-巨噬細(xì)胞 人單核細(xì)胞白血病細(xì)胞,THP-1細(xì)胞 EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY0923

IL24 Others Human 人 IL-24 / Ierleukin-24 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 大鼠β-羥(OHβ)ELISA試劑盒 Alpha Actin(Human Alpha-Actin)  人α肌動(dòng)蛋白 96T

RING5： 環(huán)指蛋白5抗體 人浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌旁皮膚細(xì)胞;CCD-1095Sk

CM-M093小鼠胎兒真皮成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基100mL 大鼠β葡萄糖酸苷酶(βGD)ELISA 試劑盒 ANKRD1(Human cardiac ankyrin repeat domain 1)  人心肌錨蛋白重復(fù)域1 96T

三、培養(yǎng)注意事項(xiàng) 

1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象 發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系。

2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需 細(xì)胞因子等，確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題，責(zé)任由 客戶自行承擔(dān)。

3. 用 75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題，部分細(xì)胞由于溫度 變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正?，F(xiàn)象。觀察好細(xì)胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁將 T25 瓶置于 37℃培養(yǎng)箱放置 2-4h。

4. 貼壁細(xì)胞可以消化，懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞，900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，棄上 清。加 5 mL PBS 重懸細(xì)胞，再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，用新鮮的培養(yǎng)基重懸 細(xì)胞，并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中，置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

5. 請(qǐng)客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。

6. 建議客戶收到細(xì)胞后前 3 天各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和我司技術(shù)部溝通 交流。由于運(yùn)輸?shù)脑?，個(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系，告知細(xì)胞 的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。

7. 該細(xì)胞僅供科研使用。

8. 備注：運(yùn)輸用的培養(yǎng)基 (灌液培養(yǎng)基) 不能再用來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞，請(qǐng)換用按照說(shuō)明書細(xì)胞培 養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞。     收到細(xì)胞后第一次傳代建議 1：2 傳代 。

9. 注意：  1:2 傳代就是 1 個(gè) T25 瓶傳 2 個(gè) T25 瓶或者 2 個(gè) 6cm 皿。不是 1 個(gè) T25 瓶傳 2 個(gè)10cm 皿。