訂購信息：
 產(chǎn)品名稱：轉(zhuǎn)基因玉米Bt10核酸檢測試劑盒
規(guī)格：48T   0.2PCR管
編號：BH-P97100
分類：PCR-熒光探針法
儲存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸：低溫、避光，快遞免費(fèi)送貨上門。
產(chǎn)品特點(diǎn)：
◇高特異性：與其他病毒無交叉反應(yīng)，無非特異性擴(kuò)增；
◇高靈敏度：檢測靈敏度可達(dá)10~100拷貝；
◇操作簡便：該系列所有試劑均采用相同的體系和條件，可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測；
◇高通量：多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。

準(zhǔn)備物品：
清理液（A）                                   毫升
染色液（t B）                                   微升
稀釋液（C）                                   毫升
溶解液（tD）                                   毫升
產(chǎn)品說明書                                   1份
使用及效果：
PCR反應(yīng)特點(diǎn)
(1) 特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合；
②堿基配對原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性；
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行，結(jié)合的特異性大大增加，被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū)，其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞；在病毒的檢測中，PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位)；在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應(yīng)液加好后，即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng)，一般在2～4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無放射性污染、易推廣。
(4) 對標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板?？芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。
CGA Others Human  FSH alpha / TSH alpha / CGA 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) Paclitaxel>99%,BR,用于細(xì)胞培養(yǎng),藥劑造模

敘利亞倉鼠皮膚細(xì)胞;GH-S1（）PaclitaxelHPLC>98%,

APP-PS1(M146L)雙基因轉(zhuǎn)染CHO細(xì)胞株;7WML6.0 癌細(xì)胞，MDA-MB-453細(xì)胞 GIK細(xì)胞，草魚腎細(xì)胞系Palonosetron HCl>98.5%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)

皮膚成纖維細(xì)胞;CCC-HSF-1Paromomycin Sulfate≥675 U/mg,USP28

HA Others H9N2 甲型流感 H9N2 (A/Guinea fowl/Hong Kong/WF10/99) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) ()Paromomycin Sulfate含量測定
豬腎細(xì)胞;LLC-PK1 惡性非霍奇金瘤患者的自然殺傷細(xì)胞，NK-92細(xì)胞 P615細(xì)胞，615小鼠狀肺腺癌瘤株鹽酸吡哆醛>98%,BRPyridoxal

Asp2胚胎腎細(xì)胞轉(zhuǎn)化細(xì)胞;FC33硅油BRSilicone oil

HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/duck/Hunan/795/2002) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) >99%,AR bromide

CL-0283Ishikawa(內(nèi)膜癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2D-α-氨基己二酸0.97D-a-Aminoadipic acid

PLK1 Others Human  PLK1 / PLK-1 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) D-高苯>90%(T),BRD-Homophenylalanine
轉(zhuǎn)基因玉米Bt10核酸檢測試劑盒CSF2 Protein Rat 重組大鼠 GM-CSF / CSF2 蛋白 (His 標(biāo)簽)1,5,9-三氮雜環(huán)十二烷(>90.0%(GC))>90.0%(GC)1,5,9-Triazacyclododecane

T-24(膀胱癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 甲型流感 H5N1 (A/common magpie/Hong Kong/5052/2007) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 1,4,7-三氮雜環(huán)壬烷(>98.0%(GC))>98.0%(GC)1,4,7-Triazacyclononane

外根殼細(xì)胞cDNAHHORSC cDNA1,4,7-基-1,4,7-三氮雜環(huán)壬烷(含穩(wěn)定劑)>98.0%(GC)(T)1,4,7-Trimethyl-1,4,7-triazacyclononane (stabilized with NaHCO3)

SELP Others Rat 大鼠 SELP / selectin P / P-selectin 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 1,4,8,11-四硫代環(huán)十四烷(>98.0%(GC))>98.0%(GC)1,4,8,11-Tetrathiacyclotetradecane

小鼠腹水瘤細(xì)胞;S-1801,4,7-三硫雜環(huán)壬烷(>98.0%(GC))>98.0%(GC)1,4,7-Trithiacyclononane
檢測步驟：
一、 試劑的準(zhǔn)備
從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振蕩混勻后，10000rpm離心10s。
設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照)，每個(gè)測試反應(yīng)體系配制如下表：
試劑 每個(gè)反應(yīng)加入的量 N個(gè)反應(yīng)加入的量
熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
（1） 計(jì)算好各試劑的使用量，加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中，充分混勻，10000rpm離心10s，向設(shè)定的N個(gè)PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液，向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬時(shí)離心10秒。
7.2 qPCR反應(yīng)條件
將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時(shí)收集熒光信號。報(bào)告基團(tuán)：設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán)：NONE，請勿選擇ROX參比熒光。