特點(diǎn)：
1. 即開即用，用戶只需要提供病毒樣品。
2. 根據(jù)地黃保守序列設(shè)計的專一性引物，與相關(guān)病毒無交叉反應(yīng)。
3. 靈敏度可以達(dá)到幾百拷貝/反應(yīng)。
4. 一管式熒光定量 PCR 檢測，避免后續(xù)污染。
5. 本試劑盒足夠 50 次 20μL 反應(yīng)體系的熒光定量 PCR。
6. 本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

使用方法：
一、樣品采集：
1、食品樣品：樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照《食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn)阪崎腸桿菌檢驗(yàn)要求進(jìn)行。
2、血液樣品：用無菌注射器抽取受檢者靜脈血2mL，注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管，立即混勻。
3、糞便樣品：取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品：取發(fā)病部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例）
1. 注意：由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照，只提供可以直接使用的 DNA段作為陽性對照。
2. 標(biāo)記 6 個離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液（用帶芯槍頭，下同）。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照，充分震蕩 1 分鐘，得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
6. 換槍頭，在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
注：上述樣品建議經(jīng)過增菌后，收集培養(yǎng)物用于檢測。 
二、DNA提取：
可采用PCR試劑盒配備的DNA抽提液，按以下說明進(jìn)行DNA核酸的粗提。也可采購上海澤葉生物科技有限公司生產(chǎn)的DNA提取試劑盒(過柱法-熒光配套)或其他合適的商業(yè)化產(chǎn)品，并按照相應(yīng)試劑盒說明進(jìn)行操作。
1、液體培養(yǎng)物：取液體培養(yǎng)物100μL加到1.5mL無菌離心管中，8000rpm離心3min，盡量吸棄上清，加入50μL DNA抽提液充分混勻，100℃恒溫10min，13000rpm離心3min，取上清5μL進(jìn)行PCR反應(yīng)。
2、固體培養(yǎng)物：挑取單克隆菌落與50μL DNA抽提液充分混勻，100℃恒溫10min，13000rpm離心3min，取上清5μL進(jìn)行PCR反應(yīng)。
3、糞便樣品：挑取米粒大小糞便于滅菌離心管中，加入0.5mL生理鹽水，振蕩混勻，13000rpm離心3分鐘，棄上清，沉淀中加入50μL DNA抽提液充分混勻，100℃恒溫10min，13000rpm離心3min取上清5μL進(jìn)行PCR反應(yīng)。
4、其他液體標(biāo)本：取標(biāo)本2-3mL，13000rpm離心3min，棄上清，沉淀中加入50μL DNA抽提液充分混勻，100℃恒溫10min，13000rpm離心3min取上清5μL進(jìn)行PCR反應(yīng)。
注：陽性對照和陰性對照為已經(jīng)抽提好的核酸(無需提取)，直接取5μL加入到反應(yīng)體系中即可。由于陽性對照濃度較高，建議在樣品制備區(qū)域加入陽性對照。 
實(shí)驗(yàn)流程：
1. 整個檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作，各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器 、耗材應(yīng)獨(dú)立使用，不能混用；實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作；三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解，樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū)，并單獨(dú)存放。
6. 為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置；不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9. 實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。
儲存條件：
14℃或－20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后，3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液：3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
CSNK1A1 Others Human 人 CSNK1A1 / CKI-alpha / CK1 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 銅標(biāo)準(zhǔn)溶液(100µg/mL,基體:1%HNO3)Copper solution質(zhì)量規(guī)格：100µg/mL,基體:1%HNO3

大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞;PC-12 [PC12]鈷標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml)Cobalt standard質(zhì)量規(guī)格：1000μg/ml

MDA-MB-231細(xì)胞，癌細(xì)胞 人肝癌細(xì)胞,Bel-7402細(xì)胞 CL-00086T-CEM (人T細(xì)胞白血病細(xì)胞)5×106cells/瓶×2六價鉻標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml，溶劑：水) Chromium Standard質(zhì)量規(guī)格：1000μg/ml，溶劑：水

倉鼠源細(xì)胞鉺標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml,基體:1.0 mol/L HNO3)Erbium standard質(zhì)量規(guī)格：1000μg/ml,基體:1.0 mol/L HNO3

CDH8 Others Human 人 Cadherin-8 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 金標(biāo)準(zhǔn)溶液(100.0μg/g,基體: 0.5mol/L的HCl溶液)Gold solution質(zhì)量規(guī)格：100.0μg/g,基體: 0.5mol/L的HCl溶液
CTSD Others Human 人 Cathepsin D / CTSD 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) Ac-rC亞1酰胺單體Ac-rC Phosphoramidite質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

DLD-1 人結(jié)直腸腺癌上皮細(xì)胞Rp-腺苷 3′,5′-環(huán)單硫代1酸酯鈉鹽Rp-Adenosine 3′,5′-cyclic Monophosphorothioate,  Salt 質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口

CMVECs微血管內(nèi)皮細(xì)胞 CMVECs micro vascular endothelial cells DMEM+10%FBSSp--腺苷 3′,5′-環(huán)單硫代1酸酯 三乙基銨鹽水合物Sp-Adenosine 3',5'-cyclic monophosphorothioate triethylammonium salt hydrate 質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口

TNFSF12 Protein Rat 重組大鼠 TNFSF12 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)2-甲基硫代二1酸腺苷2-(Methylthio)adenosine 5'-diphosphate 3 salt hydrate 質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口

人小梁網(wǎng)細(xì)胞(HTMC)(5×105) 3T3-L1, 小鼠前脂肪細(xì)胞 Mouse腺苷-2',3'-環(huán)1酸 三乙基銨鹽Adenosine 2',3'-Cyclic Phosphate Triethylammonium Salt 質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口
人結(jié)腸平滑肌細(xì)胞(HCSMC)(5×105 ) RLF, 大鼠成纖維細(xì)胞 Rattus物質(zhì)P（7-11）質(zhì)量規(guī)格：>95%,BRSubstance P (7-11)

豬腎傳代細(xì)胞;IBRS-2TA-0910，他替瑞林質(zhì)量規(guī)格：>95%,BRTA-0910, taltirelin

CDH13 Others Rat 大鼠 CDH13 / Cadherin-13 / H Cadherin 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 促甲狀腺激素釋放激素，游離酸質(zhì)量規(guī)格：>95%,BRTRH, Free Acid

CL-0157MG-63(人骨肉瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2尿皮質(zhì)激素Ⅲ，小鼠質(zhì)量規(guī)格：>95%,BRUrocortin III, mouse

L-M TK細(xì)胞，鼠胸腺激酶缺陷細(xì)胞株 人B細(xì)胞瘤細(xì)胞系,BJAB細(xì)胞 小鼠肝癌細(xì)胞;Hepa 1-6 [Hepa1-6]戊基尼泊金質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口Pentyl Paraben
香附染料法PCR鑒定試劑盒保存IL10RB Others Rat 大鼠 IL10RB / IL10R2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 4-酚，英文名或英文縮寫：4-xy7noxypyridine，級別：AR，98.5%，規(guī)格：250毫克

人腎上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL(S)-(-)-α-基-γ... (S)-(-)-3-Aminotetrahydrofuran-2-One H... 2185-3-7 250MG 通用試劑

B16F10細(xì)胞，小鼠色素瘤高轉(zhuǎn)移細(xì)胞 FRhK-4(恒河猴胚腎細(xì)胞) SV40轉(zhuǎn)染人成骨細(xì)胞;hFOB 1.1