訂購信息：
 產(chǎn)品名稱：鼠疫桿菌核酸檢測試劑盒（熒光PCR法）
規(guī)格：50T
編號：BH-P96603
分類：熒光PCR法
儲存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。
運輸：低溫、避光，快遞免費送貨上門。
產(chǎn)品特點：
◇高特異性：與其他病毒無交叉反應(yīng)，無非特異性擴(kuò)增；
◇高靈敏度：檢測靈敏度可達(dá)10~100拷貝；
◇操作簡便：該系列所有試劑均采用相同的體系和條件，可同時進(jìn)行多個檢測；
◇高通量：多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。

準(zhǔn)備物品：
清理液（A）                                   毫升
染色液（t B）                                   微升
稀釋液（C）                                   毫升
溶解液（tD）                                   毫升
產(chǎn)品說明書                                   1份
使用及效果：
PCR反應(yīng)特點
(1) 特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合；
②堿基配對原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性；
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行，結(jié)合的特異性大大增加，被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū)，其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細(xì)胞中檢出一個靶細(xì)胞；在病毒的檢測中，PCR的靈敏度可達(dá)3個RFU(空斑形成單位)；在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個細(xì)菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應(yīng)液加好后，即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng)，一般在2～4 小時完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無放射性污染、易推廣。
(4) 對標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板?？芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。
小鼠腦脊神經(jīng)元MN-r鎢粉（200目）(>99.8%,BR)Tungsten powder>99.8%,BR

LGMN Others Sus scrofa (Pig) 野豬 (Pig) Legumain / LGMN / AEP 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 鎢酸(>98%,BC)Tungstic (VI) acid>98%,BC

胚腎細(xì)胞;293 [HEK-293]震顫真菌(>98%,BC)Verruculogen from Penicillium verruculosum>98%,BC

正常大鼠腎細(xì)胞;NRK-52E 胸膜細(xì)胞瘤，SMC-1細(xì)胞 RIN-m細(xì)胞，褐鼠胰島素瘤上皮細(xì)胞羊毛脂Wool fatBR

Hep-2, 喉癌細(xì)胞系 Human5-溴-4-氯-3-吲哚基-Β-D-鹽X-GLUC,  salt>98%,分子生物學(xué)級
大鼠周神經(jīng)成纖維細(xì)胞(RPNF)(5×105)麻楓樹酚酮B（）HPLC≥98%， Jatropholone B

非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-NS3;Vero-HCV-NS33β-乙酰氧基-7,25-甘遂二1-24(R)-醇（）HPLC≥98%，3β-acetoxy-eupha- 7,25-dien-24(R)-ol

615小鼠前胃癌瘤株;Fc 小鼠腎小管上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL11-羥基柳杉酚（）HPLC≥98%，11-hydroxy-sugiol

MEF, 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞 MouseL-乳酸()≥98%,L-(+)-Lactic acid

CDH16 Others Human  CDH16 / Cadherin-16 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 二聚體雜質(zhì)美國進(jìn)口Simvastatin Dimer Impurity
鼠疫桿菌核酸檢測試劑盒（熒光PCR法）615小鼠癌瘤株;Ca763 小鼠卵巢成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL1-本基-3-吡唑烷酮50U

MN-s, 小鼠紋狀體神經(jīng)元 Mouse2,4-二錄酚 2,4-Dichlorophqnol 10-83-

CES2 Others Human  CES2 / Carboxylesterase-2 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) DEAE葡聚糖5克

胚肺細(xì)胞VA13細(xì)胞;WI-38 VA13亞系2RA鉍粒5克

GFRA1 Others Rat 大鼠 GFRA1 / GFR alpha-1 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 6361-21-32-錄-5-硝基2-Chloro-5-nitno
檢測步驟：
一、 試劑的準(zhǔn)備
從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振蕩混勻后，10000rpm離心10s。
設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照)，每個測試反應(yīng)體系配制如下表：
試劑 每個反應(yīng)加入的量 N個反應(yīng)加入的量
熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
（1） 計算好各試劑的使用量，加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中，充分混勻，10000rpm離心10s，向設(shè)定的N個PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液，向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應(yīng)條件
將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時收集熒光信號。報告基團(tuán)：設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán)：NONE，請勿選擇ROX參比熒光。