訂購信息：
 產(chǎn)品名稱：登革病毒核酸分型檢測試劑盒（熒光PCR法）
規(guī)格：50T
編號：BH-P96502
分類：熒光PCR法
儲存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸：低溫、避光，快遞免費(fèi)送貨上門。
產(chǎn)品特點(diǎn)：
◇高特異性：與其他病毒無交叉反應(yīng)，無非特異性擴(kuò)增；
◇高靈敏度：檢測靈敏度可達(dá)10~100拷貝；
◇操作簡便：該系列所有試劑均采用相同的體系和條件，可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測；
◇高通量：多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。

準(zhǔn)備物品：
清理液（A）                                   毫升
染色液（t B）                                   微升
稀釋液（C）                                   毫升
溶解液（tD）                                   毫升
產(chǎn)品說明書                                   1份
使用及效果：
PCR反應(yīng)特點(diǎn)
(1) 特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合；
②堿基配對原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性；
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行，結(jié)合的特異性大大增加，被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū)，其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞；在病毒的檢測中，PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位)；在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應(yīng)液加好后，即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng)，一般在2～4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無放射性污染、易推廣。
(4) 對標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板?？芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。
雜交瘤(B類);Z1510A2G6A2F8環(huán)戊[fg]并四苯-1,2-二酮Cyclopenta[fg]tetracene-1,2-dione

INSR Others Human  Insulin Receptor / INSR / CD220 ( Short Isoform ) 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 二苯并[a,h]蒽(>95.0%(GC))Dibenz[a,h]anthracene>95.0%(GC)

葡萄膜色素細(xì)胞;UM二苯并[b,def]芘(>98.0%(GC))Dibenzo[b,def]chrysene>98.0%(GC)

氣管上皮細(xì)胞(HTEpiC)(5×105 )1,2:8,9-二苯并五苯1,2:8,9-Dibenzopentacene

CL-0295MV3(色素瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2二苯并[g,p]稠二萘(>98.0%(HPLC))Dibenzo[g,p]chrysene>98.0%(HPLC)
CL-0467WPMY-1(正常前列腺基質(zhì)永生化細(xì)胞)5×106cells/瓶×2十八烷()分析,≥99.5%(GC)Octadecane

CXCL16 Others Rat 大鼠 CXCL16 / SR-PSOX 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 2-辛酮()分析,≥99.5%(GC)2-Octanone

大鼠虹膜色素上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL蓓薩羅丁()>99%Bexarotene

U-373MG腦神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞 U-373MG glioma cells DMEM+10% FBS>99%,ARKetoprofen

IL1B Protein Rabbit 重組兔 IL-1 beta / IL1B 蛋白()HPLC>98%,Ketoprofen
登革病毒核酸分型檢測試劑盒（熒光PCR法）CDH15 Others Rat 大鼠 Cadherin-15 / CDH15 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) N-氧基帕潘立酮美國進(jìn)口Paliperidone N-Oxide

大鼠肝星形細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL帕潘立酮-d4美國進(jìn)口Paliperidone-d4

6T-CEMT細(xì)胞白血病細(xì)胞 The 6T-CEM of human T cell leukemia cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS乳酸美國進(jìn)口Ciprofloxacin lactate

FGFBP3 Protein Human 重組 FGFBP3 蛋白 (His 標(biāo)簽)甲酰美國進(jìn)口Formyl Ciprofloxacin

Beta-TC-6(小鼠胰島素瘤胰島β細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 成纖維細(xì)胞HLF6'-(二乙氨基)-1',2'-苯并熒烷(>98.0%(GC)(T))>98.0%(GC)(T)6'-(Diethylamino)-1',2'-benzofluoran
檢測步驟：
一、 試劑的準(zhǔn)備
從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振蕩混勻后，10000rpm離心10s。
設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照)，每個(gè)測試反應(yīng)體系配制如下表：
試劑 每個(gè)反應(yīng)加入的量 N個(gè)反應(yīng)加入的量
熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
（1） 計(jì)算好各試劑的使用量，加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中，充分混勻，10000rpm離心10s，向設(shè)定的N個(gè)PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液，向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬時(shí)離心10秒。
7.2 qPCR反應(yīng)條件
將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時(shí)收集熒光信號。報(bào)告基團(tuán)：設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán)：NONE，請勿選擇ROX參比熒光。