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鰒發(fā)光桿菌說明書

更新時間:2025-12-12

簡要描述:

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鰒發(fā)光桿菌說明書 培養(yǎng)溫度:  35-37℃ 英文名稱:Photobacterium leiognathi 培養(yǎng)保藏法:培養(yǎng)后于4—6℃冰箱內(nèi)保存。
培養(yǎng)及打管說明
1、鰒發(fā)光桿菌說明書安瓿瓶開封:用浸過75%酒精的脫脂棉擦凈安瓿管,用火焰加熱其頂端,滴少量無菌水至加熱頂端使之破裂,用銼刀或者鑷子敲下已破裂的安瓿管頂端。
2、菌株恢復(fù)培養(yǎng):用無菌吸管吸取0.3--0.5ml適宜的液體培養(yǎng)基,滴入安瓿管內(nèi),輕輕振蕩,使凍干菌體溶解呈懸浮狀。吸取全部菌體懸浮液,移植于1-2支建議的培養(yǎng)基試管中,并在建議的條件下培養(yǎng)。
3、注意事項:菌種活化前,請將安瓿管保存在6-10℃的環(huán)境下,某些菌種經(jīng)過冷凍干燥保存后,延遲期較長,需要連續(xù)兩次繼代培養(yǎng)才能正常生長
4、復(fù)蘇后的菌種在傳1-2代后使用。
5、暫不啟開的安瓿及復(fù)蘇后需保藏的斜面應(yīng)于4℃中保藏。
影響質(zhì)量的因素:
⒈ 鰒發(fā)光桿菌說明書培養(yǎng)基
構(gòu)成孢子培養(yǎng)基的原材料,其產(chǎn)地、品種、加工方法和用量對孢子質(zhì)量都有一定的影響。為了保證孢子培養(yǎng)基的質(zhì)量,斜面培養(yǎng)基所用的主要原材料,糖、氮、磷含量需經(jīng)過化學分析及搖瓶發(fā)酵試驗合格后才能使用。制備培養(yǎng)基時要嚴格控制滅菌后的培養(yǎng)基質(zhì)量。斜面培養(yǎng)基使用前,需在適當溫度下放置一定的時間,使斜面無冷凝水呈現(xiàn),水分適中有利于孢子生長。 
⒉ 培養(yǎng)溫度和濕度 
微生物在一個較寬的溫度范圍內(nèi)生長。但是,要獲得高質(zhì)量的孢子,其適溫度區(qū)間很狹窄。一般來說,提高培養(yǎng)溫度,可使菌體代謝活動加快,縮短培養(yǎng)時間,但是,菌體的糖代謝和氮代謝的各種酶類,對溫度的敏感性是不同的。因此,培養(yǎng)溫度不同,菌的生理狀態(tài)也不同,如果不是用適溫度培養(yǎng)的孢子,其生產(chǎn)能力就會下降。
⒊ 培養(yǎng)時間和冷藏時間
絲狀菌在斜面培養(yǎng)基上的生長發(fā)育過程可分為五個階段:① 孢子發(fā)芽和基內(nèi)菌絲生長階段;② 氣生菌絲生長階段;③ 孢子形成階段;④ 孢子成熟階段;⑤ 斜面衰老菌絲自溶階段。
斜面孢子的冷藏時間,對孢子質(zhì)量也有影響,其影響隨菌種不同而異,總的原則是冷藏時間宜短不宜長。
灰色產(chǎn)色鏈霉菌 Streptomyces griseochromogenes

丙氨菌素鏈霉菌 Streptomyces alanosinicus

未知諾卡氏菌 Nocardia ignorata

極暗黃鏈霉菌 Streptomyces fulvissimus

釘斑鏈霉菌 Streptomyces clavifer

香川鏈霉菌 Streptomyces kagawaensis

生米卡鏈霉菌 Streptomyces mycarofaciens

肉桂(地)鏈霉菌 Streptomyces cinnamonensis

曉多鏈霉菌 Streptomyces showdoensis

金羊毛鏈霉菌 Streptomyces chrysomallus
萘啶每支添加于225ml HB4150、HB4192中(SN、GB標準)10mg/支*5

添加于225ml HB4160中制成LB14.5mg*5

添加于225ml HB4160中制成LB12.7mg*5

添加于200ml HB4160中制成LB25mg*5

每支添加于 100ml HB41553mg/支*5

糖發(fā)酵基礎(chǔ)肉湯   適用于微生物檢驗中各種糖發(fā)酵實驗,無菌加入各種糖醇類物質(zhì)(SN標準)Bromcresol Purple Broth Base250

添加于225ml HB4160中制成LB14.0mg*5

黃素每支添加于225ml HB4150、HB4192中(SN、GB標準)3.75mg/支*5

胰酪胨大豆酵母浸膏瓊(TSA-YE)   用于單增李氏菌的分純,培養(yǎng),可用于做7%羊血瓊(SN標準)Trypticase Soy-Yeast Extract Agar250

李氏菌選擇性培養(yǎng)基基礎(chǔ)(MMA)  用于單增李氏菌選擇性分離(SN標準)Modified Mcbride Agar Base250

李氏菌增菌肉湯(LB1,LB2)基礎(chǔ)    添加奈啶,黃素,即為LB1,LB2,用于李氏菌二步增菌(GB標準)Listeria Enrichment Broth Base250

七葉苷培養(yǎng)基   生化試驗培養(yǎng)基,用于細菌七葉苷利用試驗(SN標準)Esculin Medium10
鰒發(fā)光桿菌說明書雙(2-羥乙基)二硫代氨基甲酸鋅鹽(II) Bis(2-hydroxyethyl)dithiocarbamic Acid Zinc(II) Salt >98.0%(T) 25G

雙(2-羥乙基)二硫代氨基甲酸銅(II) Copper(II) Bis(2-hydroxyethyl)dithiocarbamate >98.0%(T) 25G

雙(2-氯乙基)醚 Bis(2-chloroethyl) Ether >99.0%(GC) 25G

雙(2-氯乙基)醚 Bis(2-chloroethyl) Ether >99.0%(GC) 500G

雙(2,4-*)二 Bis(2,4-dinitrophenyl) Disulfide >80.0%(LC) 25G

薯蕷皂素 DIOSGENIN(SAPOGENIN)(P) 100mg

薯蕷皂素 DIOSGENIN(SAPOGENIN)(P) 10mg
菌種的培養(yǎng):
1、鰒發(fā)光桿菌說明書菌種是指食用菌菌絲體及其生長基質(zhì)組成的繁殖材料。菌種分為母種(一級種)、原種(二級種)和栽培種(三級種)三級。工業(yè)發(fā)酵的有用菌種,其篩選步驟包括菌種分離、初篩和復(fù)篩。
2、挑選具有某種能力的有用菌種,也稱種子制備,是指菌種在一定條件下,經(jīng)過擴大培養(yǎng)成為具有一定數(shù)量和質(zhì)量的純生產(chǎn)菌種的制備過程。以作接入發(fā)酵罐中進一步擴大菌體量及合成產(chǎn)物之用。
3、種子制備包括孢子制備和菌絲體制備 菌種制備。
4、保存在沙土管或冷凍管中的生產(chǎn)菌種,用無菌手續(xù)挑取少許,接入瓊脂斜面培養(yǎng)基上,在25℃(或較高溫度)下培養(yǎng)5~7天(或較長時間。所得孢子還需進一步用較大表面積的固體培養(yǎng)基以獲得更多孢子(對于霉菌類孢子制備,多數(shù)采用大米、小米之類的天然培養(yǎng)基)。
5、將培養(yǎng)成熟的斜面孢子制成懸浮液,接種到扁瓶固體培養(yǎng)基上,于25~28℃培養(yǎng)14天。將成熟的扁瓶孢子于真空中抽干,使水分降至10%以下,并放入 4℃冰箱中備用。一次制得的孢子瓶可在生產(chǎn)上延續(xù)使用半年左右。
6、如果有些生產(chǎn)菌種不產(chǎn)孢子,如赤霉素產(chǎn)生菌或產(chǎn)孢子不多的,則可采用搖瓶液體培養(yǎng)制得菌絲體,作種子罐的種子。種子罐的目的是使接入有限的孢子或菌絲體迅速發(fā)芽、生長、繁殖成大量菌體。其中的培養(yǎng)基組分應(yīng)是易于被菌體利用的碳源(如葡萄糖)和氮源(如玉米漿),及無機鹽(如磷酸鹽)等。作為發(fā)酵罐的種子應(yīng)生命力旺盛、染色深、菌絲粗壯,無雜菌及異常菌體。接種量一般在10%~20%。

 

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