公司產(chǎn)品僅供科研研究使用、不得用于臨床診斷！

一、商品介紹：

二、細胞培養(yǎng)操作

1) 復(fù)蘇細胞：以下細胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主。將含有1 mL細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加4 mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min，棄去上清液，加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0 cm皿中，加入約8 mL培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。

2) 細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

    a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。        

    b、加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，使消化液浸潤所有細胞，將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2 min（視細胞情況而定），然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加2-3ml培養(yǎng)基終止消化。輕輕打勻后裝入無菌離心管中，1000 rpm離心5 min，棄去上清液，補加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻。        

     c、將細胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中，置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。 3) 細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為例；a、收集細胞及細胞培養(yǎng)液，裝入無菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進行細胞計數(shù)。

     b、根據(jù)細胞數(shù)量加入無血清細胞凍存液，使細胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識。將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。  

三、培養(yǎng)注意事項 

1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象 發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。

2. 仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關(guān)信息，如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需 細胞因子等，確保細胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細胞出現(xiàn)問題，責(zé)任由 客戶自行承擔(dān)。

3. 用 75%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題，部分細胞由于溫度 變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正?，F(xiàn)象。觀察好細胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁將 T25 瓶置于 37℃培養(yǎng)箱放置 2-4h。

4. 貼壁細胞可以消化，懸浮細胞直接混勻收集細胞，900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，棄上 清。加 5 mL PBS 重懸細胞，再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，用新鮮的培養(yǎng)基重懸 細胞，并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中，置于培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。

5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。

6. 建議客戶收到細胞后前 3 天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于和我司技術(shù)部溝通 交流。由于運輸?shù)脑?，個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系，告知細胞 的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。

7. 該細胞僅供科研使用。

8. 備注：運輸用的培養(yǎng)基 (灌液培養(yǎng)基) 不能再用來培養(yǎng)細胞，請換用按照說明書細胞培 養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。     收到細胞后第一次傳代建議 1：2 傳代 。

9. 注意：  1:2 傳代就是 1 個 T25 瓶傳 2 個 T25 瓶或者 2 個 6cm 皿。不是 1 個 T25 瓶傳 2 個10cm 皿。

公司正在出售的產(chǎn)品：

Matrin 3： 核基質(zhì)蛋白3抗體 HNE2, 人鼻咽癌細胞系 NIH SWISS小鼠胚細胞,NIH3T3細胞 A673(橫紋肌瘤細胞)

GP140 Others HIV 人類免疫缺陷病毒Ⅰ型 HIV-1 (group M, subtype CRF07_BC) gp140 人細胞裂解液 (陽性對照) 大鼠游離狀腺原酸(Free-T3)ELISA試劑盒 Mouse Cross-linked Carboxy-terminal telopeptide of type I collagen, I CTP  小鼠Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽 96T

MHC class I： 組織相容性復(fù)合體蛋白1抗體 倉鼠/小鼠雜交瘤細胞;145-2C11

PC 61 5.3 [PC 61; PC 61.5.3]雜交瘤細胞CD25 PC 615.3 [PC 61; PC 61.5.3] hybridoma cell line CD25 DMEM+10% Hyclone 滅活血清 大鼠游離狀腺原酸(Free-T3)ELISA 試劑盒 Fc AlphaR I /CD89(Human Receptor I for the Fc region of immunoglobulin A,Fc AlphaR I )  A Fc段受體Ⅰ 96T

MHC Class II： 組織相容性復(fù)合體蛋白2抗體 CLEC14A Others Mouse 小鼠 CLEC14A / EGFR-5 人細胞裂解液 (陽性對照)

Phospho-HDAC7(Ser155)： 0酸化組蛋白去乙酰化酶7抗體 CD40 Others Canine 狗 CD40 / TNFRSF5 人細胞裂解液 (陽性對照)

兔骨髓間質(zhì)干細胞 Rabbit bone marrow mesenchymal stem cells 人抗核糖核蛋白抗體(RNP-Ab)ELISA 試劑盒 ATF6(activating transcription factor 6) 活化轉(zhuǎn)錄因子6抗原 0.5mg

phospho-HDAC4 (Ser632)： 0酸化組蛋白去乙?；?span>4抗體 兔主動脈平滑肌細胞;CCC-SMC-2 癌細胞，MDA-MB-231細胞 J774A.1細胞，小鼠單核巨噬細胞

CD48 Others Rat 大鼠 CD48 / SLAMF2 / BCM1 人細胞裂解液 (陽性對照) 人抗核仁纖維蛋白抗體(AFA/snoRNP/U3RNP)ELISA 試劑盒 ATP1b2/Na+K+ ATPase(ATPase, Na+/K+ transporting, beta 2 polypeptide) ATP酶通道蛋白抗原 0.5mg

phospho-HDAC7(Ser486)： 0酸化組蛋白去乙?；?span>7抗體 CL-0446SUP-B15(人Ph+急淋白血病細胞系)5×106cells/瓶×2

CAKI-2人腎透明細胞癌p70 S6 kinase alpha： 核糖體p70 S6蛋白激酶抗體 SK-OV-3[SKOV-3]細胞，人卵巢癌細胞 人支氣管上皮細胞,HBE細胞 腦膜細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)

F9 Others Mouse 小鼠 Coagulation Factor IX / FIX / F9 人細胞裂解液 (陽性對照) 大鼠肌球蛋白重鏈2(MYH2)ELISA試劑盒 VD  大鼠維生 96T

p53AIP1： p53調(diào)節(jié)凋亡誘導(dǎo)蛋白1抗體 CL-0144LoVo(人大腸癌細胞)5×106cells/瓶×2

COLO 320DM 人結(jié)直腸腺癌細胞 COLO 320DM human colorectal adenocarcinoma cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS 大鼠肌球蛋白重鏈1(MYH1)ELISA試劑盒 IL-23(Mouse Interleukin 23) 小鼠白介素23 96T

PTRH2： Bcl-2轉(zhuǎn)錄抑制因子1抗體 TEK Others Human 人 Tie2 / CD202b 人細胞裂解液 (陽性對照)